Главная»Здоровье»Медицина»Гематология»11-дегидротромбоксан В2: метод определения

11-дегидротромбоксан В2: метод определения

11-дегидротромбоксан В2: метод определения

Тромбоксан А2 — представитель группы простагландинов, синтезируемый в различных клетках организма, в т. ч. и в тромбоцитах.

Предшественником тромбоксана А2 служит арахидоновая кислота, которая накапливается в клетках при активации фосфолипаз. Под действием циклооксигеназы-1 арахидонат превращается в короткоживущие простагландины G2 и Н2, далее — в тромбоксан А2. Образующийся и высвобождающийся тромбоксан А2 вызывает быструю необратимую агрегацию тромбоцитов и дополнительный спазм сосудов малого калибра. В процессе метаболизма этого вещества в печени образуется тромбоксан B2, а далее — 11-дегидротромбоксан B2, удаляемый из организма с мочой.

Поскольку период полужизни тромбоксана А„ составляет лишь 30 с, мониторинг продукции этого вещества in vivo обычно проводят косвенно, по определению тромбоксана В, в плазме крови или более стабильного его метаболита — 11-дегидротромбоксана B2 — в моче.

Принцип метода

Методики количественного определения 11-дегидротром-боксана B2 основаны на технологиях EL1SA.

Реактивы и оборудование

  • Лунки микропланшета, покрытые антителами к 11-дегидротромбоксану B2.
  • Калибратор/калибраторы.
  • Ферментный конъюгат (кроличьи или козьи антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена).
  • Буфер для образцов.
  • Промывочный буфер.
  • Раствор хромогена/субстрата (хромоген — тетраметилбензидин, субстрат — перекись водорода).
  • Стоп-реагент.
  • Оборудование для выполнения ELISA (вошер, ридер для планшетов и др.).

Образцы мочи для исследования

Концентрация 11-дегидротромбоксана B2 наиболее часто исследуют в утренней порции мочи. Для предупреждения образования тромбоксана и его метаболитов in vitro в образцы мочи добавляют ингибиторы простагландинсинтетаз (индометацин или меклофенамовая кислота).

Техника выполнения

Последовательность действий врача-лаборанта при определении уровня 11-дегидротромбоксана B2 должна строго соответствовать инструкции к набору реагентов. Калибраторы рекомендуется исследовать в дублирующих определениях и использовать новую калибровочную кривую для каждой серии диагностического набора.

Оценка результатов исследования

У здоровых лиц диапазон концентраций 11-дегидротром-боксана B2 в моче составляет 40-240 нг/ммоль креатинина (350-2100 нг/г креатинина). Рекомендуется сформировать контрольную группу и самостоятельно определить диапазон нормальных значений для каждой лаборатории.

Обязательно исследование контрольных образцов с известной концентрацией 11-дегидротромбоксана B2.

Интерпретация результатов исследования

Уровень 11-дегидротромбоксана B2 служит наиболее объективным биохимическим показателем аспиринорезистентности, о чем свидетельствуют высокие значения этого вещества в моче на фоне лечения препаратами, содержащими ацетилсалициловую кислоту. Напротив, о чувствительности к аспирину, по данным ряда авторов, может свидетельствовать 50%-е снижение уровня 11-дегидротромбоксана B2 в моче на фоне приема внутрь 325 мг аспирина в сутки.

Определение 11-дегидротромбоксана В, возможно использовать для оценки активации тромбоцитов при разных заболеваниях. Имеется информация о связи высоких значений 11-дегидротромбоксана B2 в моче с развитием осложнений атеросклероза: инфарктов, инсультов и др., в т. ч. у пациентов, получающих антиагрегантную терапию.

Причины ошибок

  • Гемолиз.
  • В образцах мочи, содержащих лейкоциты и эритроциты, возможно ложное завышение уровня 11-дегидротромбоксана B2.
  • Несоблюдение температурного режима при хранении реагентов.
  • Конденсация влаги внутри лунок (для предупреждения возникновения конденсата не следует вскрывать пакет до тех пор, пока он не прогреется).

Другие аналитические технологии Определение уровня 11-дегидротромбоксана B2 основано на учете взаимодействия антигена и антитела, поэтому для его количественного учета разработаны и другие технологии, позволяющие выявить компоненты иммунного взаимодействия, например радиоиммуноанализ с меткой I125.

  • Оцените материал
    (0 голосов)
  • Прочитано 1629 раз
Другие материалы в этой категории: « Тромбоглобулин бета: метод определения АПТВ тест »
  • Цирроз печени
    Цирроз печени Истинный цирроз печени представляет конечную, практически необратимую стадию хронических диффузных гепатитов...
  • Базедова болезнь
    Базедова болезнь Базедова болезнь в основном характеризуется усиленным тканевым обменом и повышенной реактивностью нервной системы…
  • Тиреоидит щитовидной железы
    Тиреоидит щитовидной железы Термин «тиреоидит» охватывает воспалительные заболевания щитовидной железы с различной этиологией…
  • Синдром Кушинга
    Синдром Кушинга Хронический избыток глюкокортикоидов, независимо от своей причины, обусловливает симптомы и признаки…
  • Бронхоспазм
    Бронхоспазм Бронхоспазм — состояние острой дыхательной недостаточности, которое возникает в результате бронхиальной обструкции…
  • Гипертонический криз
    Гипертонический криз Развитие гипертонического криза сопровождается следующими симптомами...